白花鬼针草提取物的抗菌研究

白花鬼针草提取物的抗菌研究
摘要：以白花鬼针草的提取物对6种常见的细菌进行抑菌试验，结果表明百花鬼针草有抑制细菌的作用。
关键词：白花鬼针草提取物；抑菌作用；**低抑菌浓度
白花鬼针草产华东、华中、华南、西南各省区。生于村旁、路边及荒地中。广布于亚洲和美洲的热带和亚热带地区。为我G民间常用草药，有清热解毒、散瘀活血的功效，主治上呼吸道感染、咽喉肿痛、急性阑尾炎、急性黄疸型肝炎、胃肠炎、风湿关节疼痛、疟疾，外用治疮疖、毒蛇咬伤、跌打肿痛等。为了进一步开发和利用百花鬼针草，现在我们对白花鬼针草进行抗菌性研究。
1 试验材料和方法
1.1白花鬼针草
供本植物白花鬼针草采自广州大学城，采样时为盛花期，成片生长。
1.2试验菌菌种
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、堪萨斯分支杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌
1．3培养基
牛肉蛋白胨培养基
1．4 主要仪器
循环水真气泵，旋转蒸发仪，恒温培养箱，电热高压蒸汽灭菌锅，超净工作台
1．5百花鬼针草提取物的提取及溶液配制方法
    取白花鬼针草茎叶5kg，切碎，然后在50摄氏度以下烘干，用植物试样粉碎机粉碎，在自制的索氏提取器中用体积浓度为95%的乙醇回流提取14天，浓缩后所得浸膏依次用石油醚、乙酸乙酯、乙醇进行萃取，分别得到白花鬼针草提取物的石油醚部分、乙酸乙酯部分、乙醇部分和水部分。乙酸乙酯部分浓缩后用无菌水定容**1g/ml（即1ml水中含有1g植物干物质），冷藏待用。
     1．6菌种活化及菌悬液制备
         供试菌种原种经培养基平板活化，扩大培养，用无菌生理盐水配制成10^7~10^8CFU/ml 的菌液，备用
     1．7抑菌活性测定
     1．7.1滤纸片法测定抑菌作用
          去直径6mm的滤纸片，置于1g/ml的白花鬼针草提取物乙酸乙酯部分的溶液中12h，对照用无菌水，110摄氏度下高压灭菌备用，将上述供试菌液各取0.5ml与相应固体培养基，在超净工作台内制成含菌平板，取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板，取含浸出液的滤纸片贴在含菌平板上，每皿贴5片，每菌做3次重复，细菌置37摄氏度的生化培养箱内培养48h后滤纸片的抑菌圈大小，比较抑菌效果。
     1．7.2**低抑菌浓度（MIC）测定
           根据肉汤连续稀释法，将100%（即1ml水中含有1g植物干物质）的白花鬼针草提取物乙酸乙酯部分稀释各5ml,把制备好的菌悬液分别吸取0.1ml，对应加入到白花鬼针草提取物乙酸乙酯部分不同浓度的稀释液中，对照用无菌水，充分摇匀，放入培养箱，细菌37摄氏度培养24h，取出观察结果，如官底有膜状、片状或粒状生长物，振荡后液体混浊者为阳性管；管内液体澄清，肉眼未见有菌生长者为阴性管，找到**低抑菌物浓度的阴性管，则为百花鬼针草提取物乙酸乙酯部分的**低抑菌浓度
2，结果与讨论
1)植物体内含有多种活性成分, 具有抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒等效果, 这已成为目前研究的热点[ 8- 10] . 本实验结果说明, 薇甘菊提取物乙酸乙酯部分溶液对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有一定的抑制生长作用.
2)据有关文献报道, 黄酮类化合物是药用植物的一大类有效成分, 具有多种生物活性, 其主要作用之一是抑菌或杀菌, 低浓度能抑菌, 高浓度能杀菌[ 11] . 本实验已初步证明薇甘菊提取物乙酸乙酯部分具有一定的抑菌作用, 为下一步从薇甘菊中可能分离出黄酮类化合物或其他的抑菌活性成分提供了理论依据.
3)薇甘菊提取物石油醚部分、乙醇部分和水部分还有待进行进一步的活性研究, 在活性监测下, 对其中的生物活性成分进行提取分离.